จะหลีกเลี่ยงการรบกวนการทดลองในการดำเนินการทดสอบเอนโดท็อกซินได้อย่างไร?

การทดสอบสารเอนโดท็อกซินจากแบคทีเรีย (BET) ดำเนินการในห้องปฏิบัติการที่ทันสมัยส่วนใหญ่ภายใต้สภาวะที่มีการควบคุมซึ่งเป็นปัจจัยสำคัญในการหลีกเลี่ยงการรบกวน

เหมาะสมเทคนิคปลอดเชื้อมีความสำคัญเมื่อเตรียมและเจือจางมาตรฐานและจัดการกับตัวอย่างเสื้อคลุมการปฏิบัตินอกอุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคลในห้องปฏิบัติการปกติ (อุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคล) ข้อกำหนดไม่ถือเป็นข้อกังวล เว้นแต่ว่าผลิตภัณฑ์ภายใต้การทดสอบต้องการการพิจารณาด้านความปลอดภัยของนักวิเคราะห์โดยเฉพาะเนื่องจากความเป็นพิษหรือการติดเชื้อถุงมือควรปราศจาก TALC เนื่องจาก TALC อาจมีสารเอนโดทอกซินในระดับที่มีนัยสำคัญเครื่องอ่านเพลท อ่างน้ำ และบล็อกความร้อนแบบแห้งที่ใช้สำหรับการบ่มตัวอย่างควรอยู่บนม้านั่งในห้องปฏิบัติการให้ห่างจากท่อความร้อน การระบายอากาศ และการปรับอากาศ (HVAC) การสั่นสะเทือนที่มีนัยสำคัญ และการจราจรในห้องปฏิบัติการที่อาจส่งผลต่อผลการทดสอบเวลาและเงื่อนไขการเก็บตัวอย่างควรได้รับการพิจารณาและจัดทำเป็นเอกสารในภายหลัง หากจำเป็น เพื่อให้แน่ใจว่าสามารถสร้างผลการทดสอบที่ถูกต้องในเวลาที่เหมาะสม

ตัวอย่างเช่น หากห้องปฏิบัติการได้รับ Water for Injection (WFI) หรือตัวอย่างระหว่างกระบวนการ จะต้องแช่เย็นหรือสามารถคงไว้ที่อุณหภูมิห้อง และนานเท่าใดก่อนการทดสอบ ขอแนะนำให้ผสมภาชนะบรรจุตัวอย่างหลักให้เพียงพอก่อนที่จะนำส่วนลงตัวทดสอบออกสำหรับการทดสอบโดยตรงหรือการเจือจางในภายหลัง

Bioendo Bacterial Endotoxin Test รวมถึงการทดลองต่างๆวิธีการจับตัวเป็นก้อนเจลการทดสอบเอนโดทอกซินและการทดสอบเอนโดทอกซินเชิงปริมาณการทดสอบวิธีเจลจับตัวเป็นลิ่มของเอนโดทอกซินเป็นการตรวจหาเอนโดท็อกซินเชิงคุณภาพ การทดลองเหล่านี้ต้องใช้วัสดุสิ้นเปลืองคือกระบวนการดีไพโรเจเนชัน เช่น หลอดปฏิกิริยาอิสระเอนโดท็อกซิน หลอดเจือจาง และเคล็ดลับปราศจากไพโรเจนการตรวจหาเอนโดทอกซินเชิงปริมาณมีการทดสอบเอนโดท็อกซินแบบไคเนติกโครโมเจนิก การทดสอบเอนโดทอกซินแบบจลนศาสตร์แบบขุ่น การทดลองเหล่านี้ต้องใช้วัสดุสิ้นเปลืองที่มีระดับสูงสุดของเอนโดทอกซินน้อยกว่า0.005EU/มล( 0.001EU/มล. ) เช่น หลอดไร้สารเอนโดท็อกซิน ทิปแบบไร้สารไพโรเจน และไมโครเพลทแบบไร้สารไพโรเจน แม้กระทั่งถังเก็บกักแบบไร้สารไพโรเจนอย่างไรก็ตาม หากเป็นการบำบัดตัวอย่าง ภาชนะบรรจุต้องเป็นขวดตัวอย่างที่ปราศจากสารเอนโดท็อกซิน

 

ในการทดสอบเอนโดท็อกซิน การรบกวนสามารถเกิดขึ้นได้จากหลายแหล่ง เช่น ส่วนประกอบของเมทริกซ์ตัวอย่าง รีเอเจนต์ทดสอบ หรืออุปกรณ์

เพื่อหลีกเลี่ยงการรบกวนการทดลอง สามารถใช้มาตรการต่อไปนี้:

1. การเตรียมตัวอย่าง: การเตรียมตัวอย่างที่เหมาะสมเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการทดสอบเอนโดทอกซินที่ถูกต้อง

เมทริกซ์ตัวอย่างควรได้รับการทดสอบอย่างละเอียดและปรับให้เหมาะสมเพื่อให้แน่ใจว่าเข้ากันได้กับการทดสอบเอนโดทอกซิน

โดยเฉพาะอย่างยิ่ง สารรบกวน เช่น ลิพิดและโปรตีนควรถูกกำจัดออกหรือลดขนาดลงโดยใช้เทคนิคที่เหมาะสม เช่น การกรองหรือการปั่นแยก

2. การควบคุมเชิงบวกและเชิงลบ: จำเป็นอย่างยิ่งที่จะต้องรวมการควบคุมเชิงบวกและเชิงลบในการทดสอบเพื่อตรวจสอบการรบกวน

การควบคุมเชิงบวกจะยืนยันการทำงานของการทดสอบ ในขณะที่การควบคุมเชิงลบจะตรวจจับการปนเปื้อนหรือการรบกวนจากส่วนประกอบการทดสอบ

3. การควบคุมคุณภาพ: ควรดำเนินการควบคุมคุณภาพของน้ำยา อุปกรณ์ และน้ำทั้งหมดที่ใช้ในการทดสอบ

สิ่งนี้ทำให้มั่นใจได้ว่ารีเอเจนต์ปราศจากการปนเปื้อนของเอนโดทอกซินและทำงานได้อย่างถูกต้อง

4. การกำหนดมาตรฐาน: การทดสอบควรได้รับการกำหนดมาตรฐานเพื่อให้แน่ใจว่าผลลัพธ์ทั้งหมดสามารถเปรียบเทียบและทำซ้ำได้

ซึ่งเกี่ยวข้องกับการใช้กราฟมาตรฐานเพื่อสอบเทียบการทดสอบและการใช้เทคนิคมาตรฐานสำหรับการเตรียมตัวอย่าง การบ่ม และการตรวจจับ

5. การตรวจสอบ: การทดสอบควรได้รับการตรวจสอบเพื่อให้แน่ใจว่ามีความเฉพาะเจาะจง ละเอียดอ่อน และเชื่อถือได้

ซึ่งเกี่ยวข้องกับการทดสอบตัวอย่างต่างๆ รวมถึงตัวอย่างที่ทราบว่ามีเอนโดท็อกซิน เพื่อกำหนดความถูกต้องและแม่นยำของการทดสอบ

เมื่อปฏิบัติตามมาตรการเหล่านี้ การรบกวนจะลดลงและสามารถทำการทดสอบเอนโดทอกซินที่แม่นยำได้