จะหลีกเลี่ยงการรบกวนการทดลองในการทดสอบเอนโดท็อกซินได้อย่างไร

การทดสอบเอนโดท็อกซินจากแบคทีเรีย (BET) ดำเนินการในห้องปฏิบัติการที่ทันสมัยส่วนใหญ่ภายใต้สภาวะที่ได้รับการควบคุม ซึ่งเป็นปัจจัยสำคัญในการหลีกเลี่ยงการรบกวน

เหมาะสมเทคนิคปลอดเชื้อเป็นสิ่งสำคัญในการเตรียมและเจือจางมาตรฐานและการจัดการตัวอย่างเสื้อคลุมการปฏิบัตินอกอุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคลในห้องปฏิบัติการปกติ (ชุดป้องกันส่วนบุคคล) ข้อกำหนดนั้นไม่เป็นปัญหา เว้นแต่ผลิตภัณฑ์ภายใต้การทดสอบต้องการการพิจารณาด้านความปลอดภัยของนักวิเคราะห์โดยเฉพาะ เนื่องจากความเป็นพิษหรือการติดเชื้อถุงมือควรปราศจาก TALC เนื่องจาก TALC อาจมีเอนโดทอกซินในระดับที่มีนัยสำคัญเครื่องอ่านเพลท อ่างน้ำ และบล็อคความร้อนแบบแห้งที่ใช้สำหรับบ่มตัวอย่างควรอยู่บนม้านั่งในห้องปฏิบัติการ โดยห่างจากท่อทำความร้อน การระบายอากาศ และเครื่องปรับอากาศ (HVAC) การสั่นสะเทือนที่สำคัญ และการจราจรในห้องปฏิบัติการที่อาจส่งผลต่อผลการทดสอบเวลาและเงื่อนไขในการเก็บตัวอย่างควรกำหนดและจัดทำเป็นเอกสารในภายหลัง หากจำเป็น เพื่อให้แน่ใจว่าผลการทดสอบที่ถูกต้องสามารถสร้างขึ้นได้ในเวลาที่กำหนด

ตัวอย่างเช่น หากห้องปฏิบัติการได้รับน้ำสำหรับฉีด (WFI) หรือตัวอย่างระหว่างกระบวนการ จะต้องแช่เย็นหรือสามารถคงไว้ที่อุณหภูมิห้องได้หรือไม่ และนานแค่ไหนก่อนการทดสอบ ขอแนะนำให้ผสมภาชนะบรรจุตัวอย่างหลักอย่างเพียงพอก่อนนำส่วนย่อยทดสอบออกสำหรับการทดสอบโดยตรงหรือการเจือจางในภายหลัง

การทดสอบเอนโดท็อกซินของแบคทีเรีย Bioendo การทดลองต่างๆ ได้แก่วิธีเจลจับตัวเป็นก้อนการทดสอบเอนโดท็อกซินและการทดสอบเอนโดทอกซินเชิงปริมาณการทดสอบเอนโดท็อกซินวิธีก้อนเจลเป็นการตรวจหาเอนโดท็อกซินเชิงคุณภาพ การทดลองเหล่านี้ต้องใช้วัสดุสิ้นเปลืองคือการประมวลผลการดีไพโรจีเนชัน เช่น หลอดปฏิกิริยาไร้เอนโดท็อกซิน หลอดเจือจาง และเคล็ดลับปลอดไพโรเจนการตรวจหาเอนโดทอกซินเชิงปริมาณมีการทดสอบเอนโดทอกซินโครจีนิกจลน์, การทดสอบเอนโดทอกซินความขุ่นทางจลนศาสตร์, การทดลองเหล่านี้ต้องใช้วัสดุสิ้นเปลืองต้องเป็นไปตามระดับสูงสุดของเอนโดทอกซินน้อยกว่า0.005EU/มล(0.001EU/มล.) เช่น หลอดปลอดสารเอนโดท็อกซิน ทิปปลอดสารไพโรเจน และไมโครเพลทปลอดสารไพโรเจน แม้แต่แหล่งกักเก็บสารปราศจากสารไพโรเจนอย่างไรก็ตาม หากการรักษาตัวอย่าง ภาชนะจะต้องเป็นขวดตัวอย่างปลอดสารเอนโดท็อกซิน

 

ในการทดสอบเอนโดทอกซิน การรบกวนอาจเกิดขึ้นได้จากหลายแหล่ง เช่น ส่วนประกอบเมทริกซ์ตัวอย่าง รีเอเจนต์ทดสอบ หรืออุปกรณ์

เพื่อหลีกเลี่ยงการรบกวนการทดลอง ให้ใช้มาตรการต่อไปนี้:

1. การเตรียมตัวอย่าง: การเตรียมตัวอย่างที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการทดสอบเอนโดทอกซินที่แม่นยำ

เมทริกซ์ตัวอย่างควรได้รับการทดสอบอย่างละเอียดและปรับให้เหมาะสมเพื่อให้แน่ใจว่าสามารถเข้ากันได้กับการทดสอบเอนโดทอกซิน

โดยเฉพาะอย่างยิ่ง สารที่รบกวน เช่น ลิพิดและโปรตีนควรถูกกำจัดออกหรือทำให้เหลือน้อยที่สุดโดยใช้เทคนิคที่เหมาะสม เช่น การกรองหรือการหมุนเหวี่ยง

2. การควบคุมเชิงบวกและเชิงลบ: จำเป็นต้องรวมการควบคุมเชิงบวกและเชิงลบในการทดสอบเพื่อตรวจสอบสัญญาณรบกวน

ส่วนควบคุมเชิงบวกจะยืนยันการทำงานของการทดสอบ ในขณะที่ส่วนควบคุมเชิงลบจะตรวจจับการปนเปื้อนหรือการรบกวนจากส่วนประกอบของการทดสอบ

3. การควบคุมคุณภาพ: ควรทำการควบคุมคุณภาพกับรีเอเจนต์ อุปกรณ์ และน้ำทั้งหมดที่ใช้ในการทดสอบ

เพื่อให้แน่ใจว่ารีเอเจนต์ปราศจากการปนเปื้อนของเอนโดทอกซินและทำงานได้อย่างถูกต้อง

4. การกำหนดมาตรฐาน: การทดสอบควรได้รับมาตรฐานเพื่อให้แน่ใจว่าผลลัพธ์ทั้งหมดสามารถเปรียบเทียบและทำซ้ำได้

ซึ่งเกี่ยวข้องกับการใช้เส้นโค้งมาตรฐานเพื่อสอบเทียบการทดสอบและการใช้เทคนิคที่เป็นมาตรฐานสำหรับการเตรียม การบ่ม และการตรวจจับตัวอย่าง

5. การตรวจสอบ: การทดสอบควรได้รับการตรวจสอบเพื่อให้แน่ใจว่ามีความเฉพาะเจาะจง ละเอียดอ่อน และเชื่อถือได้

ซึ่งเกี่ยวข้องกับการทดสอบตัวอย่างต่างๆ ซึ่งรวมถึงตัวอย่างที่ทราบว่ามีสารเอนโดทอกซิน เพื่อตรวจสอบความถูกต้องและแม่นยำของการทดสอบ

เมื่อปฏิบัติตามมาตรการเหล่านี้ การรบกวนจะลดลง และสามารถทำการทดสอบเอนโดทอกซินได้อย่างแม่นยำ