การใช้เทคนิคโครโมจีนิกกับการทดสอบเอนโดทอกซินของแบคทีเรีย

เทคนิคโครโมจีนิกเป็นหนึ่งในสามเทคนิคที่ประกอบด้วยเทคนิคเจลก้อนและเทคนิคความขุ่นเพื่อตรวจหาหรือวัดปริมาณเอนโดทอกซินจากแบคทีเรียแกรมลบ โดยใช้อะมีโบไซต์ไลเซตที่สกัดจากเลือดสีน้ำเงินของปูเกือกม้า (Limulus polyphemus หรือ Tachypleus tridentatus)มันสามารถจำแนกได้เป็นการทดสอบจุดสิ้นสุด-โครโมเจนิก หรือการทดสอบจลน์-โครโมเจนิกตามหลักการทดสอบเฉพาะที่ใช้

หลักการของปฏิกิริยาคือ: อะมีโบไซต์ไลเซตประกอบด้วยเอนไซม์ซีรีนโปรตีเอส (โปรเอนไซม์) ซึ่งสามารถกระตุ้นโดยเอนโดทอกซินจากแบคทีเรียเอนโดทอกซินกระตุ้นการทำงานของโปรเอนไซม์เพื่อสร้างเอนไซม์ที่กระตุ้นการทำงาน (เรียกว่า coagulase) ซึ่งเอนไซม์ตัวหลังจะกระตุ้นการแยกตัวของสารตั้งต้นที่ไม่มีสี และปล่อย pNA ของผลิตภัณฑ์ที่มีสีเหลืองออกมาpNA ที่ปล่อยออกมาสามารถวัดด้วยโฟโตเมตริกที่ 405 นาโนเมตรและการดูดกลืนแสงมีความสัมพันธ์เชิงบวกกับความเข้มข้นของเอนโดทอกซิน จากนั้นความเข้มข้นของเอนโดทอกซินก็สามารถหาปริมาณได้ตามนั้น


เวลาโพสต์: Sep-29-2019