การทดสอบเอนโดท็อกซินคืออะไร?

การทดสอบเอนโดท็อกซินคืออะไร?

เอนโดทอกซินเป็นโมเลกุลที่ไม่ชอบน้ำซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของไลโปโพลีแซ็กคาไรด์คอมเพล็กซ์ซึ่งก่อตัวเป็นเยื่อหุ้มชั้นนอกของแบคทีเรียแกรมลบส่วนใหญ่พวกมันจะถูกปล่อยออกมาเมื่อแบคทีเรียตายและเยื่อหุ้มชั้นนอกสลายตัวเอนโดทอกซินถือเป็นส่วนสำคัญในการตอบสนองของสารก่อไฟและผลิตภัณฑ์ทางหลอดเลือดที่ปนเปื้อนด้วยสารไพโรเจนสามารถนำไปสู่การพัฒนาของไข้ การกระตุ้นให้เกิดการอักเสบ การช็อก อวัยวะล้มเหลว และการเสียชีวิตในมนุษย์

การทดสอบเอนโดทอกซินคือการทดสอบเพื่อตรวจหาหรือวัดปริมาณเอนโดทอกซินจากแบคทีเรียแกรมลบ

กระต่ายถูกใช้เพื่อตรวจจับและวัดปริมาณเอนโดทอกซินในผลิตภัณฑ์ยาตั้งแต่แรกตามข้อมูลของ USP RPT เกี่ยวข้องกับการติดตามการเพิ่มขึ้นของอุณหภูมิหรือมีไข้หลังจากฉีดยาทางหลอดเลือดดำเข้าไปในกระต่ายและ 21 CFR 610.13(b) กำหนดให้มีการทดสอบไพโรเจนแบบกระต่ายสำหรับผลิตภัณฑ์ทางชีวภาพที่ระบุ

ในทศวรรษ 1960 Fredrick Bang และ Jack Levin พบว่าอะมีโบไซต์ของปูเกือกม้าจะจับตัวกันเป็นก้อนเมื่อมีสารเอนโดทอกซินที่ลิมูลัส อะเมโบไซต์ ไลเซต(หรือ Tachypleus Amebocyte Lysate) ได้รับการพัฒนาขึ้นเพื่อทดแทน RPT ส่วนใหญ่ใน USP การทดสอบ LAL เรียกว่าการทดสอบเอนโดท็อกซินจากแบคทีเรีย (BET)และ BET สามารถทำได้โดยใช้ 3 เทคนิค คือ 1) เทคนิคเจลก้อน;2) เทคนิคความขุ่น3) เทคนิคโครโมเจนิกข้อกำหนดสำหรับการทดสอบ LAL ประกอบด้วย pH ความแข็งแรงของไอออน อุณหภูมิ และเวลาในการฟักที่เหมาะสมที่สุด

เมื่อเปรียบเทียบกับ RPT BET นั้นรวดเร็วและมีประสิทธิภาพอย่างไรก็ตาม BET ไม่สามารถแทนที่ RPT ได้อย่างสมบูรณ์เนื่องจากการทดสอบ LAL อาจถูกรบกวนโดยปัจจัยต่างๆ และไม่สามารถตรวจพบสารไพโรเจนที่ไม่ใช่เอนโดทอกซินได้