รีเอเจนต์ LAL หรือรีเอเจนต์ TAL สำหรับการทดสอบเอนโดทอกซิน

Limulus amebocyte lysate (LAL) หรือ Tachypleus tridentatus lysate (TAL) เป็นสารสกัดน้ำจากเซลล์เม็ดเลือดจากแมงดาทะเล

และเอนโดทอกซินเป็นโมเลกุลที่ไม่ชอบน้ำซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของไลโปโพลีแซ็กคาไรด์คอมเพล็กซ์ซึ่งก่อตัวเป็นเยื่อหุ้มชั้นนอกของแบคทีเรียแกรมลบส่วนใหญ่ผลิตภัณฑ์ทางหลอดเลือดที่ปนเปื้อนสารไพโรเจนสามารถนำไปสู่ผลลัพธ์ร้ายแรง เช่น ไข้ อาการช็อก อวัยวะล้มเหลว หรือแม้แต่การเสียชีวิต

รีเอเจนต์ LAL/TAL สามารถทำปฏิกิริยากับเอนโดทอกซินจากแบคทีเรียและไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ (LPS)ความสามารถในการจับตัวและการแข็งตัวของเอนโดทอกซินของ LAL เป็นสิ่งที่ทำให้สิ่งนี้มีคุณค่าอย่างยิ่งต่ออุตสาหกรรมยาของเราเองและนี่คือเหตุผลว่าทำไมจึงสามารถใช้รีเอเจนต์ LAL/TAL เพื่อตรวจจับหรือวัดปริมาณเอนโดทอกซินจากแบคทีเรีย

ก่อนที่จะพบว่า LAL/TAL สามารถใช้ในการทดสอบเอนโดทอกซินจากแบคทีเรียได้ กระต่ายจะถูกนำมาใช้เพื่อตรวจจับและวัดปริมาณเอนโดทอกซินในผลิตภัณฑ์ทางเภสัชกรรมเมื่อเปรียบเทียบกับ RPT แล้ว BET ที่มีรีเอเจนต์ LAL/TAL นั้นรวดเร็วและมีประสิทธิภาพ และเป็นวิธีที่ได้รับความนิยมในการตรวจสอบความเข้มข้นของเอนโดทอกซินแบบไดนามิกในอุตสาหกรรมยา และอื่นๆ

การทดสอบสารเอนโดทอกซินของก้อนเจลหรือที่เรียกว่าการทดสอบ Limulus Amebocyte Lysate (LAL) หรือที่เรียกว่า Lyophilized Amebocyte Lysate (LAL) เป็นวิธีที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการตรวจหาและวัดปริมาณสารเอนโดทอกซินในผลิตภัณฑ์ต่างๆ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในอุตสาหกรรมยาและอุปกรณ์ทางการแพทย์ถือเป็นวิธีแก้ปัญหาที่จำเป็นในด้านการตรวจหาเอนโดทอกซินเนื่องจากประสิทธิภาพและการยอมรับตามกฎระเบียบ

การทดสอบ LAL ขึ้นอยู่กับหลักการที่ว่าเซลล์เม็ดเลือดของปูเกือกม้า (Limulus polyphemus หรือ Tachypleus tridentatus) มีปัจจัยการแข็งตัวของเลือดที่ทำปฏิกิริยากับเอนโดทอกซินของแบคทีเรีย ส่งผลให้เกิดก้อนคล้ายเจลปฏิกิริยานี้มีความไวสูงและจำเพาะต่อเอนโดทอกซิน ซึ่งเป็นส่วนประกอบที่เป็นพิษของเยื่อหุ้มชั้นนอกของแบคทีเรียแกรมลบ

มีสาเหตุหลายประการว่าทำไมการทดสอบเอนโดท็อกซินของก้อนเจลจึงถือเป็นวิธีแก้ปัญหาที่จำเป็นในการตรวจหาเอนโดท็อกซิน:

1. การยอมรับตามกฎระเบียบ: การทดสอบ LAL ได้รับการยอมรับและยอมรับโดยหน่วยงานกำกับดูแล เช่น United States Pharmacopeia (USP) และ European Pharmacopoeia (EP) เป็นวิธีมาตรฐานสำหรับการทดสอบเอนโดทอกซินการปฏิบัติตามกฎระเบียบเหล่านี้เป็นสิ่งจำเป็นในการรับรองความปลอดภัยและคุณภาพของผลิตภัณฑ์ยา

2. ความไวและความจำเพาะ: การทดสอบ LAL มีความไวสูง ทำให้สามารถตรวจจับเอนโดทอกซินในระดับต่ำมากได้สามารถตรวจจับความเข้มข้นของเอนโดท็อกซินได้ต่ำถึง 0.01 หน่วยต่อมิลลิลิตร (EU/mL)ความจำเพาะของการทดสอบทำให้มั่นใจได้ว่าจะตรวจพบเอนโดทอกซินเป็นหลักและลดผลลัพธ์ที่เป็นบวกลวงให้เหลือน้อยที่สุด

3. ความคุ้มค่า: โดยทั่วไป การทดสอบเจลก้อนเอนโดทอกซินถือเป็นวิธีแก้ปัญหาที่ประหยัดเมื่อเปรียบเทียบกับวิธีอื่น เช่น การตรวจโครโมจีนิกหรือความขุ่นต้องใช้รีเอเจนต์และอุปกรณ์น้อยลง ซึ่งช่วยลดต้นทุนการทดสอบโดยรวมนอกจากนี้ การมีอยู่ของรีเอเจนต์ LAL ที่ได้มาตรฐานในท้องตลาดทำให้ห้องปฏิบัติการทำการทดสอบได้สะดวก

4. มาตรฐานอุตสาหกรรม: การทดสอบ LAL ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในอุตสาหกรรมยาและอุปกรณ์ทางการแพทย์ เพื่อเป็นวิธีการมาตรฐานในการตรวจหาเอนโดทอกซินโดยเป็นส่วนสำคัญของกระบวนการควบคุมคุณภาพในระหว่างการผลิตผลิตภัณฑ์ทางเภสัชกรรมและอุปกรณ์ทางการแพทย์ เพื่อให้มั่นใจว่าปฏิบัติตามข้อกำหนดด้านกฎระเบียบ

อย่างไรก็ตาม เป็นที่น่าสังเกตว่าการทดสอบการทดสอบเอนโดทอกซินของก้อนเจลอาจมีข้อจำกัด เช่น การรบกวนจากสารบางชนิด และอาจให้ผลลัพธ์ที่เป็นบวกลวงหรือลบลวงในบางกรณี อาจใช้วิธีการอื่น เช่น การตรวจวิเคราะห์โครโมเจนิกหรือความขุ่น เพื่อเสริมหรือตรวจสอบความถูกต้องของผลลัพธ์ที่ได้รับจากการทดสอบ LAL